点击图片查看原图
“盐酸克伦特罗单克隆抗体”参数说明
| 种类： | 单克隆抗体 | 有效期： | 36个月 |
“盐酸克伦特罗单克隆抗体”详细介绍
本抗体利用杂交瘤技术制备了3株可分泌盐酸克伦特罗抗体的单克隆抗体,对其进行纯化鉴定;在此基础上建立了克伦特罗金标检测试纸条,从而达到快速、简单、方便检测克伦特罗的目的。 首先利用重氮法将CL和卵清白蛋白OVA、牛血清白蛋白BSA偶联产生免疫抗原BSA-CL和包被抗原OVA-CL。通过紫外扫描和蛋白电泳分析鉴定,发现偶联前后载体蛋白OVA、BSA的吸收峰发生改变,电泳结果显示偶联物的分子量大于载体蛋白的分子量,初步判定偶联成功。 以BSA-CL免疫Balb/C小鼠。三免后,以OVA-CL包被酶标板,用间接非竞争ELISA法检测小鼠血清,血清效价最高达1:1600。四免后取效价最高的小鼠的脾脏细胞,利用50%PEG1000将其与SP2/0细胞进行细胞融合,制备杂交瘤细胞。经过对培养上清的筛选和杂交瘤细胞的克隆化,最终得到3株能分泌盐酸克伦特罗抗体的杂交瘤细胞株:CL1-A3、CL2-C9和CLA-D8。用扩大培养所得的杂交瘤细胞诱导小鼠产生腹水,其效价分别为1.56x10~(-5)、7.8×10~(-6)和6.25x10~(-5)。经双向免疫扩散实验鉴定,3株单克隆抗体蛋白均为IgG,其亚类型为IgCl。辛酸-硫酸铵沉淀法纯化单抗腹水后,测得其蛋白含量分别为3.51mg/mL、6.50mg/mL和5.57mg/mL。用SDS-PAGE进行抗体纯度鉴定,电泳图谱均显示了IgG抗体及其重链和轻链条带,分离的抗体纯度在90%以上。选取其中纯化的单抗CL2-C9进行间接ELISA实验,结果表明其最小检出限为0.01mg/kg